温郁金SRAP-PCR反应体系建立及条件优化

目的 研究温郁金Curcuma wenyujin的SRAP-PCR扩增体系最适宜的条件。方法 以提取纯化温郁金基因组DNA为模板，利用PCR扩增技术，对SRAP反应中主要影响因素Mg2+浓度、dNTP浓度、模板DNA质量浓度、引物浓度、Taq聚合酶浓度进行优化。结果 根据实验确定的最佳体系为25 μL SRAP反应体系，其中Mg2+ 2.0 mmol/L，Taq聚合酶2.0 U，引物浓度1.6 μmol/L，模板DNA 0.4 ng/μL，dNTP 2.0 mmol/L，10×PCR缓冲液2.5 μL。结论 通过扩增条件优化实验，扩增的产物条带清晰明亮、重复性好，确定的反应体系及反应程序适用于温郁金的SRAP分子标记，为今后温郁金的遗传多样性研究奠定了基础