红花ERF1转录因子的克隆及植物表达载体的构建

目的 克隆1条红花AP2/ERF家族转录因子编码区序列，并构建植物表达载体。方法 在红花转录组测序基础上，利用RT-PCR方法克隆1条红花AP2/ERF家族转录因子编码区序列（CtERF1）并进行生物信息学分析，利用ClustalW 1.83软件构建系统进化树，在CtERF1基因序列两端引入Spe I和XbaI酶切位点，构建含有35 S启动子的植物超表达载体pBASTA-CtERF1。结果 CtERF1基因编码297个氨基酸，且具有典型的AP2/ERF基因的功能结构域，含有1个AP2区域，为ERF亚族蛋白，亚细胞定位分析推测其定位在细胞质和细胞核上。系统进化分析表明，CtERF1基因编码氨基酸与其他物种氨基酸具有一定的同源性，其中与杨树和人参的亲缘关系最近。通过分子生物学方法，成功构建pBASTA-CtERF1植物表达载体。结论 成功克隆了1条红花AP2/ERF家族转录因子编码区基因CtERF1，并构建了植物表达载体pBASTA-CtERF1