Notch和BMP信号通路介导红景天苷促进小鼠骨髓间充质干细胞向神经元细胞定向分化研究

目的 探讨BMP和Notch信号通路介导红景天苷诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)向神经细胞定向分化的分子机制。方法 实验分为对照组、红景天苷诱导组和阻断组。利用细胞免疫荧光化学方法、Real-Time PCR方法和Western blotting方法 分别研究了红景天苷对MSCs的增殖、形态以及对BMP和Notch信号通路的影响。结果 红景天苷影响MSCs的增殖且促进其形成神经元样细胞;细胞免疫荧光结果显示,红景天苷可降低Notch1和Jadge1阳性表达率(P<0.05);红景天苷诱导细胞12~72 h时,Notch1和Hes1 mRNA表达丰度明显下调(P<0.05);特异性阻断剂DAPT阻断Notch信号通路后,神经元细胞标志分子NSE、MAP-2和β-tubulin III mRNA和NSE、β-tubulin III蛋白的表达水平与阻断前比较显著上调(P<0.05)。12 h时Smad5和Smad8 mRNA的表达水平显著上调(P<0.01),且12和24 h时Smad1/5/8蛋白表达上调(P<0.05);Noggin阻断BMP信号通路后,NSE、MAP-2和β-tubulin III mRNA的表达丰度与诱导组比较明显下调(P<0.05);DAPT和Noggin同时阻断Notch和BMP信号通路后,与单独阻断BMP信号通路后比较,MAP-2和β-tubulin III mRNA的表达上调,NSE和β-tubulin III蛋白的表达水平上调(P<0.05)。结论 红景天苷通过抑制Notch信号通路、激活BMP信号通路诱导MSCs向神经元细胞定向分化