蝙蝠葛碱对肝癌Huh7细胞增殖和凋亡的作用及机制研究

目的 研究蝙蝠葛碱对肝癌Huh7细胞增殖和凋亡的作用，探索其抗肿瘤的作用机制和与Hedgehog信号通路的关系。方法 不同质量浓度（2、4、8 μg/mL）的蝙蝠葛碱处理Huh7细胞，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测Huh7细胞增殖能力的变化；流式细胞术分析细胞凋亡；real-time PCR、Western blotting法检测Hedgehog信号通路相关基因及蛋白表达水平。结果 随着蝙蝠葛碱质量浓度及作用时间的增加，其对Huh7细胞增殖的抑制率升高。其中蝙蝠葛碱8 μg/mL作用48 h对细胞增殖抑制率最高（48.8%）。蝙蝠葛碱可明显诱导Huh7细胞发生凋亡。随着蝙蝠葛碱质量浓度的增大，细胞的凋亡率显著升高（P<0.05、0.01）。与对照组比较，蝙蝠葛碱各质量浓度组细胞Hedgehog信号通路中PTCH1、GLi1、SMO、SHH mRNA和蛋白表达水平显著降低，同时cleaved Caspase-3蛋白水平显著升高，而Bcl-2表达水平降低（P<0.05、0.01），并呈质量浓度依赖性。结论 蝙蝠葛碱可明显抑制Huh7细胞的增殖，促进其凋亡，其可能通过抑制Hedgehog信号通路发挥作用