红花DHDPS基因全长cDNA的克隆及植物表达载体构建

目的 克隆红花赖氨酸生物合成途径关键酶二氢吡啶二羧酸合酶（dihydrodipicolinate synthase DHDPS）基因的全长cDNA序列，构建植物超表达载体。方法 根据红花转录组文库注释信息获得红花DHDPS（CtDHDPS）基因的中间序列，通过RT-PCR与RACE技术从红花种子中克隆CtDHDPS基因全长cDNA序列。采用DNA重组技术构建pBASTA-CtDHDPS植物超表达载体。结果 分离CtDHDPS基因全长1 309 bp，开放阅读框954 bp，编码317个氨基酸，编码蛋白理论等电点为5.93，相对分子质量约为34 750.79。通过DNA重组技术成功构建了植物超表达载体pBASTA-CtDHDPS。结论 获得CtDHDPS基因全长cDNA序列并成功构建植物超表达载体，为阐明CtDHDPS基因的生物学功能及其在红花赖氨酸生物合成途径中作用机制提供科学依据