卷叶贝母环阿屯醇合成酶基因的克隆及表达分析

目的 对卷叶贝母Fritillaria cirrhosa中参与生物碱合成的关键酶环阿屯醇合成酶（cycloartenol synthase，CAS）基因进行克隆，并对其进行生物信息学和表达分析。方法 基于转录组测序结果，通过PCR技术克隆卷叶贝母CAS基因（FcCAS）开放阅读框（open reading frame，ORF）序列，并基于在线工具对cDNA序列进行生物信息学分析。通过荧光定量（qRT-PCR）手段检测FcCAS在野生鳞茎与愈伤组织（通过激素组合刺激获得的组织培养物）中的表达情况并测定总生物碱的含量。结果 FcCAS编码区ORF长为2 271 bp，编码756个氨基酸，并与NCBI上公布的天门冬、芭蕉、油棕等植物CAS蛋白的相似性达80%以上；qRT-PCR与总生物碱含量测定实验表明FcCAS的表达水平与总生物碱含量的变化趋势一致，都是愈伤组织高于野生鳞茎。结论 FcCAS在不同组织状态下表达量差异较大，FcCAS是一个有生物学功能的蛋白质，受激素组合诱导表达，为进一步研究CAS对卷叶贝母生物碱含量的影响和表达调控奠定基础