小叶莲中graphislactone A的分离制备及其抗肿瘤作用机制研究

目的 确定小叶莲中graphislactone A的制备分离方法；探讨graphislactone A诱导人乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR凋亡的作用机制。方法 小叶莲药材采用醋酸乙酯超声提取，提取物经过硅胶柱色谱法富集目标成分，再用重结晶法纯化。采用MTT法检测graphislactone A对乳腺癌细胞MCF-7和乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR的细胞毒活性。采用流式细胞术、RT-PCR技术和Western blotting法分别检测graphislactone A对乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR凋亡、凋亡相关基因及P-糖蛋白（P-gp）蛋白表达的影响。结果 建立了小叶莲中graphislactone A的制备分离方法。Graphislactone A对乳腺癌细胞MCF-7和乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR具有细胞毒活性，IC50值分别为2.38、9.35μmol/L，且能够上调乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR中p53、bax、caspase-3基因的表达，下调bcl-2基因和P-gp的蛋白表达。结论 Graphislactone A为首次从高等植物中发现的酚类化合物，该制备分离方法效率高、样品回收率高，得到的目标成分纯度高。与阳性药依托泊苷相比，Graphislactone A对乳腺癌细胞MCF-7和乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR具有较强的细胞毒活性，且能够诱导其凋亡，其机制可能与p53的表达水平上调、激活caspase-3通路、调节bax和bcl-2的相对比例，下调P-gp的蛋白表达有关