拟康宁木霉T 51几丁质酶活性及内切几丁质酶基因克隆与分析

木霉是一类重要的生防真菌, 木霉产生的几丁质酶在其生物防治的重寄生过程中起着重要作用。拟康宁木霉Trichoderma koningiopsis T 51是一株对番茄灰霉病有生防潜力的木霉菌株, 本文测定了T 51菌株产生几丁质酶的活性, 结果表明T 51在PDB中液体培养以及与灰霉病菌在PDA上对峙培养时产生的几丁质酶活性显著受到灰霉病菌的诱导。采用RACE技术首次克隆了拟康宁木霉T 51中一个几丁质酶基因Tkchit42, 全长为1 817 bp, 包含4个外显子和3个内含子。预测该基因有一个1 275 bp的开放阅读框, 编码424个氨基酸, 预测的蛋白总分子量为46.378 kDa, 预测的等电点(pI)为5.16, 与T.koningii中42 kDa内切几丁质酶的氨基酸序列相似性达到99%