单管多重RT-PCR同时检测大豆种子中三种检疫性植物病毒

我国大豆年进口量持续增长，快速、准确地检测进境大豆种子中可能携带的病原物是防止检疫性有害生物入境传播和扩散的有效手段。菜豆荚斑驳病毒(BPMV)、烟草环斑病毒(TRSV)和番茄环斑病毒(ToRSV)均是被大豆种子携带的检疫性有害生物。本研究建立了在单一PCR管中同时检测这3种检疫性植物病毒及大豆内源基因Bd-30 K的多重RT-PCR方法。研究结果表明，所建立的多重RT-PCR方法具有较好的特异性和灵敏度，检测含BPMV、TRSV和ToRSV RNA的最低浓度分别为0.45、0.0093和0.004 ng/μL，从大豆种子中同时检测3种病毒的最低RNA浓度为0.58 ng/μL