原生质体法介导真菌遗传转化的研究进展

原生质体法介导真菌遗传转化体系是实现大规模随机、定点突变和菌种改良的方法之一, 为研究真菌致病性和侵染机制奠定了基础。原生质体法构建转化体系的步骤包括原生质体的制备、转化与再生, 其中关键是原生质体的制备, 通常采用酶解法破除细胞壁获得原生质体, 其获得率直接影响转化效率。转化通常借助于聚乙二醇(PEG)介导、电击或限制性内切酶法完成, 其中PEG介导的原生质体转化法较传统, 技术较成熟; 电击法操作较简单; 限制性内切酶(REMI)介导的整合转化, 因其转化效率较高, 可产生大量稳定的转化子, 正被越来越多地应用于丝状真菌的遗传转化