核盘菌一分支酸变位酶同源效应蛋白的亚细胞定位

前期研究表明核盘菌Sclerotinia sclerotiorum产生的一种分支酸变位酶同源效应蛋白能够提高其致病能力。为了进一步研究该效应蛋白在核盘菌致病过程中的作用机制, 我们通过构建GFP融合蛋白对其分泌行为和亚细胞定位开展了研究。首先通过PCR技术扩增了该基因的启动区+信号肽 (SP)+叶绿体定位肽 (CTP)的DNA序列, 构建GFP融合载体, 然后借助REMI技术转化核盘菌原生质体, 筛选GFP能够表达的转化子, 最后接种转化子菌丝于烟草叶片, 激光共聚焦检测GFP荧光信号, 发现GFP荧光与叶绿体自体荧光共定位, 表明该效应蛋白可分泌进入寄主叶绿体内发挥作用