CRISPR/Cas系统与志贺菌毒力和耐药的关系及插入序列IS600对cse2表达水平的影响

[目的] 了解志贺菌中成簇的规律间隔短回文重复序列（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats，CRISPR）的分布及其与毒力和耐药的关系，并分析志贺菌中插入序列IS600对CRISPR相关蛋白基因cse2 mRNA表达水平的影响。[方法] 利用课题组前期设计的引物PCR扩增志贺菌的3个CRISPR位点、CRISPR相关蛋白基因cse2、耐药基因和毒力基因；改良Kirby-Bauer （K-B）纸片法进行药敏试验；台盼蓝计数试验检测细菌毒力；Real-time PCR检测志贺菌中cse2基因mRNA表达水平。分别分析志贺菌中CRISPR/Cas系统与耐药基因、耐药表型、毒力基因、毒力表型的关系；了解IS600对CRISPR相关蛋白基因cse2 mRNA表达水平的影响。[结果] 志贺菌中CRISPR1位点阴性细菌的毒力强；插入序列IS600使cse2 mRNA表达水平降低。[结论] 志贺菌中存在CRISPR1、2、3位点；CRISPR1位点与毒力有关；插入序列IS600对cse2 mRNA表达水平有影响