生防菌密旋链霉菌Act12中SPA7074缺失突变株的构建及其次级代谢产物鉴定

[目的] 通过基因工程手段构建生防菌Act12转录调控因子SPA7074缺失突变株，并挖掘其中活性次级代谢产物资源和探讨其活性机理。[方法] 利用同源重组方法敲除Act12基因组中可能的TetR家族转录调控因子编码基因spa7074（accession number：KU955325），平板实验检测缺失突变株发酵液抑菌活性的变化，并通过HPLC比较代谢图谱，然后通过质谱及核磁共振对差异峰对应化合物进行结构鉴定。[结果] SPA7074缺失突变株对几种病原真菌的拮抗活性显著增强，比较代谢图谱表明出现数个差异峰，将最显著差异峰所对应化合物进行分离纯化鉴定，结果为寡霉素D。[结论] 本研究通过基因工程手段敲除生防菌株Act12中的负转录调控转录因子，使得突变菌株抑菌活性显著增强，并获得了产量达野生型菌株7倍的寡霉素D高产菌株Δspa7074