应用iTRAQ定量蛋白质组学研究海分枝杆菌mkl的基因功能

[目的]通过分离海分枝杆菌野生株和mkl突变株的全菌蛋白，并进行差异蛋白质组分析，以期为探索分枝杆菌重要毒力基因mkl的功能提供新思路。[方法]以海分枝杆菌野生株和mkl突变株为研究材料，提取全菌蛋白，iTRAQ试剂标记后进行质谱鉴定和定量分析，并利用UniProt数据库对差异蛋白进行生物信息学分析。[结果]共鉴定出在野生株和mkl突变株中差异表达蛋白566个，其中在突变株中上调表达蛋白232个（比值≥1.4），下调表达蛋白334个（比值≤0.7）。生物信息学预测这些蛋白主要参与细菌脂质代谢、细胞壁和细胞进程、中间代谢、呼吸作用等生物学功能。其中DesA3下调最显著，其功能为脂肪酸去饱和酶，与油酸合成相关，进一步验证发现mkl突变株在不含油酸的固体培养基中生长受限，提示mkl可能在油酸的生物合成通路中发挥功能。[结论]通过iTRAQ分析了海分枝杆菌mkl突变株和野生株的差异表达蛋白谱，发现可能影响分枝杆菌油酸、脂质等合成代谢通路，为进一步研究mkl基因在分枝杆菌致病中发挥作用的相关机制奠定了基础