紫草素对白色念珠菌的抑制作用机制

[目的]研究紫草素抑制白色念珠菌的作用机制。[方法]通过微量稀释法测定紫草素对白色念珠菌的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MFC）；紫外分光光度法测定紫草素对白色念珠菌细胞膜渗透性的影响；扫描电镜观察紫草素对菌体形态的影响；激光共聚焦显微镜测定紫草素对白色念珠菌细胞内钙离子浓度的影响；卵黄平板培养基法检测紫草素对白色念珠菌的细胞膜磷脂酶活性的影响；RT-PCR检测紫草素对白色念珠菌PLB1和PLB2基因表达量的影响。[结果]紫草素对白色念珠菌有较强的抑制作用，其对白色念珠菌的MIC和MFC分别为16μg/mL和32μg/mL。紫草素能破坏白色念珠菌细胞膜的完整性，使细胞膜的通透性增加，导致细胞内DNA和RNA等大分子物质的泄漏和细胞内钙离子的流失。其中MIC的紫草素作用菌体16 h后，上清液中的DNA和RNA等大分子含量与对照组相比增加了117.32%（P<0.01）；细胞内的[Ca2+]降低了72.02%（P<0.01）。扫描电镜结果也证明了紫草素对白色念珠菌细胞膜的破坏作用。紫草素也能抑制白色念珠菌分泌磷脂酶，且呈浓度剂量依赖。其中，与对照组相比，MIC的紫草素能使白色念珠菌分泌磷脂酶的量下降56.3%（P<0.01）。RT-PCR结果显示，紫草素能抑制编码磷脂酶B的基因PLB1和PLB2的表达量，其中1/2 MIC的紫草素作用白色念珠菌16 h后，与对照组相比，PLB1和PLB2基因的相对表达量分别降低了56.4%和61.4%（P<0.01）。[结论]紫草素对白色念珠菌有较强的抑杀作用，其作用机制是通过破坏白色念珠菌细胞膜的完整性，增加菌体细胞膜的通透性，导致细胞内DNA和RNA等大分子的泄漏和细胞内[Ca2+]的流失，最终引起菌体的死亡。而紫草素对白色念珠菌磷脂酶分泌的抑制作用，致使其不能及时维护和修复由紫草素造成的细胞膜的破坏和损伤，也是导致菌体死亡的原因