基于T7启动子表达系统的牛副流感病毒3型微型基因组的构建与拯救

[目的] 通过负链RNA病毒反向遗传学操作，构建并拯救以T7启动子表达系统为基础的牛副流感病毒3型（Bovine parainfluenza virus type 3，BPIV3）微型基因组。[方法] 分别构建表达该病毒NP、P和L蛋白的辅助质粒px8δT-PT1-bPIV3-NP、px8δT-PT1-bPIV3-P和px8δT-PT1-bPIV3-L以及含增强型绿色荧光蛋白（Enhanced green fluorescent protein，EGFP）开放读码框（Open reading frame，ORF）、BPIV3前导序列（Leader region）、转录起始信号（Gene start signal，GS）、转录终止信号（Gene end signal，GE）和尾随序列（Trailer region）等顺式作用元件（Cis-acting elements）的微型基因组质粒pSC11-bPIV3-EGFP，鉴定正确后，采用2种不同方法拯救BPIV3微型基因组，并通过观察荧光表达情况判断是否拯救成功。[结果] 成功构建了基于T7启动子表达系统的BPIV3微型基因组，并实现了拯救。[结论] 该系统的成功构建，有助于今后对BPIV3开展基因修饰研究