镰刀菌Q7-31T内切葡聚糖酶Egn21的分离纯化及酶学性质

摘要：【目的】为进一步研究镰刀菌Q7-31T产生的植物细胞壁降解酶的酶系信息。【方法】以1% (W/V) 蛋白胨为氮源，0.5% (W/V)燕麦秸秆为碳源，20 °C、120 r/min振荡培养3 d，诱导发酵培养菌株，获得的粗酶液经过Sephacry S-100凝胶柱层析和DEAE琼脂糖弱阴离子交换柱层析，最终得到纯化的内切葡聚糖酶，并对其进行酶学性质分析及串联质谱鉴定。【结果】研究表明：Egn21的分子质量为44.25 kDa，等电点为4.91；酶学特性研究显示：Egn21降解羧甲基纤维素的最适反应温度为40 °C，在45 °C以下比较稳定。该酶最适pH为6.0，在pH为5.0–8.0条件之间比较稳定。Co2+、Zn2+和Mg2+对其没有明显作用，而Fe2+、Ca2+、K+、Na+和Mn2+对酶活性有抑制作用，Hg2+会使酶失去活性。【结论】从Q7-31T中分离纯化得到的内切葡聚糖酶Egn21，经过酶学特性与串联质谱鉴定结果显示其属于GH5家族