液相色谱-串联质谱法快速检测干血点样品中尿酸

摘要 建立了一种高通量液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）检测干血点(DBS)样品中尿酸(UA)的方法。采用自动液体操作平台对样品进行高通量自动化前处理，首先用含有UA-1,3-15N2稳定同位素内标的Tris水溶液进行萃取，然后用含有0.1%甲酸、0.05%三氟乙酸的乙腈溶液沉淀蛋白质。处理后的样品经CN色谱柱分离，多反应监测(MRM)模式进行LC-MS/MS分析。结果表明，在DBS样品中，UA在7.8~1 000 μmol/L浓度范围内的线性关系良好(R2＝0.999)；检出限为3.1 μmol/L (S/N=3)；定量限为12.5 μmol/L(S/N=10)；平均回收率为95%~101%；日内相对标准偏差(RSD)为4.2%~12%；日间RSD为5.3%~14%。以样品中UA检测结果的总体RSD不超过15%来考察样品稳定性，分别将样品在-20 ℃保持30天、在37 ℃保持7天、反复冻融5次，样品中UA检测结果总体RSD小于10%，表明样品稳定性良好。将该方法与传统生化分析方法相比较，并分析了204份血样，相关性较好(R2＝0.946)。此方法可为有限采血条件下UA的检测及UA相关疾病的大规模筛查提供新途径