花生长链酰基辅酶A合成酶6基因(LACS6)的克隆、鉴定与组织表达

摘要： 长链酰基辅酶A合成酶（long chain acyl-CoA synthetase：LACS）是油脂代谢的重要催化酶。为揭示花生脂肪酸代谢机理，采用RT-PCR技术，首次从花生Arachis hypogaea L.克隆到LACS6（GenBank登录号：KU301860），分析该基因的结构组成，预测编码氨基酸与其他植物的同源性，采用Real-Time PCR技术对LACS6的组织表达进行研究。结果显示，花生LACS6基因全长2 116 bp，包含2 088 bp的ORF，编码695个氨基酸，有23个外显子和22个内含子。氨基酸序列比对显示花生LACS6有真核生物酰基辅酶A合成酶保守结构域，并含有保守的激活位点和绑定位点。同源性分析发现花生LACS6与鹰嘴豆、绿豆、大豆、梅等13种物种的氨基酸一致性在79%~87%，进化树分析显示，花生LACS6与鹰嘴豆等豆科植物亲缘较近。实时荧光PCR分析表明，花生LACS6在花生根、茎、叶、子房柄、仁和花等组织均有表达，且差异明显。子房柄和花的表达量极高，与根、茎、叶和仁等组织有极显著差异，花生LACS6组织的表达量大小排序为花 > 子房柄 > 叶 > 仁 > 茎 > 根。本研究结果为揭示花生脂肪酸代谢和品质改良提供理论依据