响应面法优化漆酶基因lac1338表达漆酶的发酵条件

为提高Escherichia coli BL21（DE3）中漆酶基因lac1338的表达水平，采用响应面法对其发酵条件进行优化. 首先用Plackett-Burman法筛选出3个影响较大的重要因素，分别为温度（Q1）、诱导时间（Q3）以及诱导前菌体浓度OD600 nm（Q4）. 继而结合响应面分析，建立以漆酶酶活为响应值的二次回归方程模型，即Y = 75.33 + 3.30A + 9.35B + 5.35C -1.69AB + 0.80AC + 11.50BC - 25.97A2 + 1.83B2 - 4.66C2，从中获得最优的发酵条件：诱导温度为31 ℃，诱导时间为20 h，诱导前的菌体浓度OD600 nm值为1.8. 采用该发酵条件，供试菌株的漆酶比酶活达到22.8 U/mg，较优化前漆酶的表达量（10.7 U/mg）提高了2.13倍，其试验值与预测值基本相符. 说明预测模型可靠性高，可应用于漆酶发酵条件的优化.（图4 表5 参25