一种提取土壤样品中麻疯树核糖体失活蛋白curcin的方法

建立并优化了一种土壤麻疯树核糖体失活蛋白curcin的提取方法. 优化后的提取步骤和参数为：0.1 g含curcin的土壤样品加入1 mL的提取缓冲液（5 mmol/L磷酸盐，0.1 mmol/L EDTA，0.2% SDS（m/V），20 mmol/L β-巯基乙醇，pH 7.2），在18 ℃以上的室温条件下振荡混匀1 h，离心取上清液. 重复该过程一次，合并上清液. 上清液于4 ℃放置过夜，离心取上清液，即为样品粗提液. 该样品粗提液即可用单克隆抗体间接酶联免疫吸附法（ELISA）进一步检测其中的curcin含量. 该方法对curcin含量高于8 μg/g土壤可进行定性检测，对于curcin含量分别为100、500、1 000 μg/g的土壤样品的回收率分别达到49.3% ± 2.8%、64.2% ± 3.62%和78.33% ± 4.24%. 该方法的变异系数保持在5%左右，对来自四川3个样地的土壤有较好的适用性. 本研究建立优化的提取方法可为评估curcin蛋白在农业领域应用的生态风险提供技术支持. （图3 表3 参16