重组钝顶节旋藻藻蓝蛋白基因在聚球藻中的表达*

藻蓝蛋白（Phycocyanin）具有抗氧化、消炎、抗癌、增强免疫等生理活性和荧光特性. 本研究从钝顶节旋藻（Arthrospira platensis）中克隆藻蓝蛋白基因，构建重组藻蓝蛋白并在聚球藻7942（Synechococcus sp. PCC 7942）中表达. 利用PCR技术克隆钝顶节旋藻藻蓝蛋白α亚基（cpcA）与β亚基（cpcB）基因，在cpcA的 5’端及3’端加入编码6 × His标签基因，克隆HiscpcA基因，并构建同源重组表达载体pUBCA3D-1. 通过自然转化法将pUBCA3D-1转入聚球藻中，经筛选鉴定获得了转基因藻株. PCR验证结果表明，目的基因整合到聚球藻基因组中的概率为86.6%. 转基因聚球藻在无抗生素筛选条件下连续培养2个月，仍能稳定表达重组CpcA. 以上结果表明，重组钝顶节旋藻藻蓝蛋白在聚球藻中稳定表达；研究结果为节旋藻cpcA基因改造、重组CpcA进一步分离纯化以及重组藻蓝蛋白的生产奠定了基础.（图4 表2 参22