波形蛋白对EV71感染小鼠脑组织引起NLRP3炎性小体活化的影响

目的观察肠道病毒71型（EV71）感染的小鼠中枢神经系统中波形蛋白（VIM）介导NLRP3炎性小体的活化。方法取3~ 5 d龄的VIM基因敲除型乳鼠（VIM-/-）40只，随机分为EV71感染实验组和空白对照组，20只/组，实验组每只腹腔注射浓度为1× 108半数组织培养感染剂量（TCID50）病毒液10 μL，空白组腹腔注射无菌PBS 10 μL，再将同品质的野生型乳鼠（WT）40只以同样 方式分组处理。观察小鼠感染状态1周，提取小鼠脑脊液（CSF）和脑组织全蛋白、RNA及组织切片，通过Western blot、ELISA、 RT-PCR检测小鼠中枢神经系统的炎症小体激活状况，以及免疫组化技术考察小鼠中枢神经系统的损伤。结果与空白组比 较，VIM-/-实验组小鼠在感染EV71 后CSF 和脑组织中NLRP3 炎症小体及其下游产物IL-1β、caspase-1 含量无明显变化；而 WT实验组小鼠相较VIM-/-型实验组的NLRP3、IL-1β和caspase-1含量显著升高（P<0.05）；同时WT型实验组IL-1β和caspase-1 的mRNA拷贝数亦明显高于VIM-/-型实验组小鼠（P<0.05）；VIM-/-感染EV71 的脑组织神经元受损程度较WT小鼠明显轻微 （P<0.05）。结论EV71通过感染小鼠脑组织诱发VIM基因介导的NLRP3炎症小体活化，释放IL-1β和caspase-1，这可能是中枢 神经系统炎症和神经元损伤的原因之一