Shh信号通路对小鼠胚胎肺发育的调控作用

目的探讨经典Shh信号通路对小鼠胚胎肺发育过程中上皮、间质（支气管软骨、平滑肌）发育的调控作用。方法利用免 疫组化检测Shh通路受体Smo（Smoothened）以及血小板源性生长因子受体（Pdgfr-α）的表达；利用Pdgfr-α间质特异性表达的特 点构建Pdgfr-α-cre，通过他莫昔芬的诱导，在E12.5-E16.5（E, embryo）天转基因小鼠肺间质中特异性敲除Shh 关键信号分子 Smo；利用免疫荧光观察E12.5-E16.5小鼠胚胎肺间质特异性敲除Shh信号通路之后，小鼠胚胎肺发育过程中上皮、间质（支气管 软骨、平滑肌）发育的改变，探讨Shh信号通路在小鼠胚胎肺发育过程中对上皮-间质转化的作用。结果Smo在假腺期早期的肺 上皮与间质中显著表达，后表达量逐渐下调，主要集中在肺间质，Pdgfr-α在假腺期早期胚胎肺中集中在远端肺上皮及间质，后期 逐渐往近端间质发展，直至集中在主支气管周围的近端间质；首次利用Pdgfr-α-Cre系统在间质中特异性敲除Smo，成功制备了 Smo缺失小鼠模型；与对照组肺相比，E12.5-E16.5基因敲除组小鼠的肺体积缩小，支气管分支形成减少；近端上皮指标P63的表 达量下降（P<0.05）；平滑肌标志物表达水平发生改变；支气管软骨发育滞后，黏蛋白表达量下降。结论Shh信号通路的时空特 异表达在小鼠胚胎肺上皮、间质（支气管软骨、平滑肌）发育的起着重要的调控作用