基于脾脏脱细胞支架构建组织工程肝脏的体内植入策略

目的体外构建基于脾脏脱细胞支架的组织工程肝脏，并探索其理想的体内植入策略。方法获取健康SD大鼠脾脏，采用 低温冻融结合十二烷基硫酸钠灌注法制备脾脏脱细胞支架（DSM）。Seglen改良两步胶原酶灌注法获取大鼠原代肝细胞，经脾 动脉再植入DSM内体外构建组织工程肝脏。以SD大鼠为受体，比较异位血管吻合移植、肝断面缝合移植、肝内嵌入移植以及 肠系膜包裹移植4种策略的优缺点。结果肝细胞支架种植率为（74.5±7.7）%，HE染色与扫描电镜显示细胞状态良好，免疫荧光 染色证实细胞正常表达ALB、G6Pc。异位血管吻合移植手术难度高，围手术期死亡率高达33.3%，术后6 h支架内形成大量血 栓；肝断面缝合无法迅速建立充分血供，术后3 d未见成形移植物；肝内嵌入移植法细胞最长可存活14 d；肠系膜包裹移植术后 14 d时支架内细胞存活率为（38.3±7.1）%。结论利用DSM构建的组织工程肝脏能部分表达肝细胞特异性功能，肠系膜包裹移 植策略简单安全有效，是目前可行的体内移植方式