携带靶向抑制囊泡谷氨酸转运体3干扰RNA的单纯疱疹病毒载体可减弱小鼠触诱发痛

目的构建含靶向囊泡谷氨转运体3（Vglut 3）的特异性RNA干扰序列的1型单纯疱疹病毒载体，并观察其经坐骨神经接 种后缓解小鼠触诱发痛的作用。方法首先构建携带Vglut3特异性短发卡RNA（shRNA）的重组1型单纯疱疹病毒载体。将重 组载体通过坐骨神经接种，检测其在小鼠触诱发痛模型中的镇痛效果。分别用von Frey丝和Hargreaves’实验测试小鼠的机械 性触诱发痛和热痛敏，通过免疫组织化学和免疫印迹法评估背根神经节中VGLUT3的表达。结果成功构建了重组1型单纯疱 疹病毒载体HSV-1-shvglut3。经坐骨神经接种后，该载体可将Vglut3特异性shRNA逆行运输至背根神经节。触诱发性疼痛模 型小鼠接种HSV-1-shvglut3载体2周后，背根神经节中VGLUT3表达下调，小鼠的机械性缩爪阈值回升至大致基础水平。这种 镇痛效应持续超过两个星期，未出现明显的系统副作用，且小鼠热痛阈没有明显变化。结论表达于背根神经节中的Vglut3是 一个针对触诱发痛极具前景的干扰靶点。我们构建的HSV-1-shvglut3载体通过外周接种，对触诱发痛有特异、安全、高效、持久 的镇痛作用