微生物尿酸氧化酶的筛选、酶学性质及重组表达

尿酸氧化酶 (Urate oxidase，Uox) 是一种催化尿酸氧化为尿囊素的酶，常用于尿酸的检测以及痛风和高尿酸血症治疗。文中从土壤中筛选出一株Uox高产菌株OUC-1，经16S rRNA部分基因序列分析，与苛求芽孢杆菌Bacillus fastidiosus序列相似度达99%。B. fastidiosus OUC-1的Uox经纯化后，分析表明该酶反应最适pH和温度分别为10.0和40 ℃；Uox以尿酸为底物反应动力学参数Km值为 (0.15±0.04) mmol/L (n=5)。Mg2+能够提高该酶性活性，而Zn2+和SDS能强烈抑制该酶的酶活。参考GenBank中苛求芽孢杆菌基因组中的uox基因序列，成功扩增出uox基因，通过SWISS-MODEL对Uox空间结构进行预测，推测该酶是同源四聚体，单亚基分子量为35.38 kDa。文中将uox基因克隆并在大肠杆菌中表达，为后续的Uox的性能改造提供条件和技术支持