牛乳源金黄色葡萄球菌EsxA蛋白的表达及免疫原性分析

为分析牛乳源金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus) EsxA蛋白的免疫原性，构建EsxA-pET-28a重组表达质粒，重组质粒经诱导表达后进行SDS-PAGE和Western blotting鉴定。用纯化后重组EsxA蛋白免疫小鼠，用间接ELISA检测免疫小鼠血清中的IgG、IgG1和IgG2a水平；免疫小鼠经S. aureus菌株攻击后，检测小鼠肝、脾、肾组织荷菌数和免疫保护率，观察S. aureus菌株攻击后小鼠肝、脾、肾病理组织学变化。结果表明，成功诱导表达了EsxA重组蛋白，该重组蛋白免疫小鼠后血清抗体效价可达1∶900，与对照相比，重组蛋白免疫后可减少小鼠肝、脾、肾组织的荷菌数，减轻这些脏器的病理损伤，对免疫小鼠保护率达75%。上述结果表明，该重组EsxA蛋白具有良好的免疫原性