PDGF-B免疫原的制备及其腹水抗体对HepG2细胞增殖的影响

观察利用融合表达载体pET28-Trx合成的人血小板源性生长因子B (Human platelet-derived growth factor B，hPDGF-B) 免疫原的免疫原性，及其诱导小鼠产生针对hPDGF-B的腹水抗体对人HepG2细胞增殖的抑制作用。本研究首先选择hPDGF-B的第103–118及152–167氨基酸序列作为抗原表位，构建pET28-Trx-重组原核表达载体，表达并纯化获得6×his Trx-hPDGF-BΔ103-118及6×his Trx -hPDGF-BΔ152-167重组蛋白；然后使用纯化后的重组蛋白免疫小鼠，并给予腹腔注射H22肿瘤细胞制备腹水抗体，ELISA法检测抗体滴度，Western blotting法检测纯化腹水抗体与膜结合的PDGF-B结合能力；最后通过CCK8实验检测外源性PDGF-BB和两种纯化腹水抗体对肝癌HepG2细胞增殖的作用。研究发现上述两种重组蛋白作为免疫原均可诱导小鼠产生高滴度的PDGF-B中和性抗体；两种hPDGF-B纯化腹水抗体能明显抑制PDGF-BB对肝癌HepG2细胞增殖的促进作用。结果提示，Trx-PDGF-B重组蛋白作为免疫原有望为PDGF-B疫苗的制备提供新的方法，也为临床上肝癌的治疗提供了一种新的思路