一株抗蓝舌病病毒8型VP2蛋白单克隆抗体识别的线性抗原表位的鉴定

为研究本实验室制备的一株抗蓝舌病病毒8型 (BTV-8) VP2蛋白的单克隆抗体 (MAb) 3G11识别的B细胞抗原表位，利用噬菌体肽库展示技术对3G11识别的抗原表位进行筛选并鉴定。经过4轮淘选后挑取蓝斑测序，测序结果经分析后获得KLLAT序列，与BTV-8 VP2蛋白氨基酸序列比对后获得共同的短肽序列为283LL284；合成4种短肽序列：KLLAA、KALAT、KLAAT和KLLAT，与3G11细胞上清和腹水分别进行间接ELISA鉴定，结果表明，短肽KLLAA和KLLAT与3G11细胞上清及腹水具有较强的结合能力；与24种BTV标准阳性血清反应结果表明，这两种短肽都可与BTV-8阳性血清发生特异性反应；序列分析结果可见，该表位的氨基酸序列283LL284在不同来源的BTV-8毒株间保守，确定283LL284为MAb3G11识别抗原表位的关键氨基酸。本研究为建立8型BTV特异性的免疫学检测方法和相关病毒蛋白的功能研究奠定了基础