高产吡咯喹啉醌扭脱甲基杆菌的高通量选育

吡咯喹啉醌 (PQQ) 是一种细菌脱氢酶的辅酶，具有促进机体生长、调节机体自由基水平等功能，应用于食品、医药等领域。由于化学合成法成本较高，微生物发酵法生产PQQ受到关注。目前，发酵法生产PQQ产量较低，限制了其工业应用。然而，由于对PQQ菌株的合成与调控机制尚缺乏深入理解，以及对野生型菌株缺乏必要的基因工程改造手段，目前采用代谢工程强化PQQ合成菌株还缺乏相关基础。因此，本研究以扭脱甲基杆菌Methylobacterium extorquens I-F2为研究对象，整合常压室温等离子体诱变、流式细胞术分选和高通量筛选策略，对样品制备和流式分选过程进行优化，最终筛选出一株PQQ高产突变菌株1-C6，PQQ产量比出发菌株I-F2提高98.02%。本文所述的流式细胞术结合高通量筛选方法能简单、快速地获得高产突变菌株，相比于基因工程改造和传统筛选方法，具有提升效果明显且易于实施等优势