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ISSN: 2333-9721
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家蚕EGFR配体的鉴定和验证

DOI: 10.13345/j.cjb.160271

Keywords: 家蚕,表皮生长因子受体,配体,蛋白互作,信号通路

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表皮生长因子受体 (EGFR) 是广泛存在于后生动物中的多功能受体,其配体的种类、活化方式、配体与EGFR之间的相互作用以及激活的信号通路在哺乳动物中研究得较为深入。而非脊椎动物中,EGFR配体在各物种间差异较大,目前缺乏对除果蝇以外的其他昆虫EGFR配体的认识。通过同源比对、结构域预测、mRNA翻译起始序列分析和系统进化树构建,在家蚕中鉴定到2个EGFR的配体,命名为BmEGF-1和BmEGF-2。BmEGF-1与果蝇Spitz有较高的同源性和一致的Rhomboid识别序列,BmEGF-2为Vein的同源分子。经原核表达和纯化获得了BmEGF-1胞外区段,利用Sf9细胞分泌BmEGFR胞外区段,并通过pull-down实验验证了两者之间存在相互作用。在BmE细胞中表达BmEGF-1后,通过Western blotting检测到ERK和p38 MAPK的磷酸化水平增强,说明其不仅能激活经典的ERK信号通路,还可能通过p38 MAPK信号通路参与其他生理过程,为进一步研究EGFR配体在家蚕中的生物学功能提供了参考

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