一种猪溶菌酶来源的抗菌六肽的分离鉴定及其性质

为提高猪溶菌酶 (Sus scrofa lysozyme，SSL) 的抗革兰氏阴性菌活性，将其进行了不同蛋白酶的水解，选择抗革兰氏阴性菌效果最好的水解产物，利用凝胶过滤色谱和反相制备色谱进行分离，对其功能成分进行液质联用鉴定。对分离得到的物质进行抗菌活性验证和生物信息学的分析，并在此基础上对抗菌物质的杀菌机理进行了探讨。结果表明，胰蛋白酶的水解产物具有较高的杀灭革兰氏阴性菌的活性，进一步分离纯化得到了具有抗革兰氏阴性菌活性的六肽A-W-V-A-W-K。经化学合成验证，该六肽既保留了SSL的部分抗菌活性，也具备杀灭多种革兰氏阴性菌的能力。进一步分析发现其位于SSL分子C端的一个螺旋-回环-螺旋的结构中，并由此推测其杀菌机理是通过改变细胞膜的渗透性，进而使细胞内溶物流出而造成细胞死亡，而抗菌实验也验证了这一推测。该抗菌肽的发现为后续提高SSL的抗菌活性提供了理论依据