基于包膜蛋白和Tat蛋白筛选HIV-1细胞融合抑制剂的高效方法

旨在建立一个细胞-细胞融合系统，高效筛选对HIV-1病毒细胞-细胞间传播有抑制作用的药物。构建了pEGFP-Tat质粒，将pEGFP-Tat质粒和HIV-1包膜质粒共转染HEK-293T细胞，成为表达Tat蛋白和包膜蛋白的效应细胞，然后与表达CD4及辅助受体和β-半乳糖苷酶、荧光素酶双报告基因的靶细胞TZM-bl融合，建立了细胞-细胞融合系统，并进行条件优化，确定了最佳的融合体系。用阳性融合抑制剂maraviroc以及没有融合抑制作用的AZT和raltegravir作用于该体系，证明该系统可以特异性有效筛选具有细胞融合抑制作用的药物。用该系统测试了8个样本，发现两种样品对融合有一定的抑制作用。该方法背景值低，特异性强，可用来高效筛选具有切断HIV-1病毒细胞-细胞间传播作用的抗病毒药物