白蚁及其共生菌来源的4种木质纤维素酶的共表达

天然的木质纤维素材料含有纤维素、半纤维素和木质素等成分。降解天然木质纤维素底物时，需要木质纤维素酶共同作用。近年在木质纤维素酶的相互协同作用方面的研究引起人们的关注，成为一个新的研究热点，文中使用两个不同的共表达载体pETDuet-1和pRSFDuet-1，在大肠杆菌中共表达了白蚁及其肠道微生物来源的β-葡萄糖苷酶、内切β-1,4-葡聚糖酶、漆酶和木聚糖酶这4种木质纤维素酶，经过SDS-PAGE分析得到了与理论值一致的蛋白条带，同时经过酶活验证，这4种蛋白都具有酶活性。以磷酸处理的微晶纤维素 (PASC) 为底物，测定了共表达酶粗酶液与单独表达酶混合液的协同作用因子，从还原糖的产量上经计算共表达的粗酶液比单独表达酶的混合液对PASC的降解协同作用提高44%；以滤纸和磷酸处理的玉米芯为底物，测定降解协同作用，分别提高了34%和20%。结果表明，共表达酶的降解效率要高于混合的单组分酶液降解效率的总和