小鼠胎肝细胞透明质酸3D培养体系的建立

为了利用透明质酸建立小鼠胎肝细胞3D培养体系，分离获得胚胎12～14d胎肝细胞，利用KM培养基进行初步2D肝干/祖细胞的筛选培养，并利用透明质酸及KM培养基配制水凝胶建立3D细胞培养体系．胎肝细胞在2D体系中呈现克隆状生长．分离培养获得的肝干/祖细胞，克隆在透明质酸建立的3D培养体系保持增殖活性，并进一步获得肝细胞功能特性，表现为3D培养上清中白蛋白合成和尿素水平显著增加．定量PCR结果显示，随着3D培养时间的延长，其肝细胞干性标志如AFP、CK19、EpCAM、Prox1等表达水平都大幅度降低且接近成年小鼠肝脏表达水平．本研究成功建立基于透明质酸的小鼠胎肝细胞的3D无血清培养体系，并可促进小鼠胎肝细胞的肝细胞功能进一步成熟