Sox9在温度依赖型性别决定中的功能初探

在一些爬行动物中，个体的性别完全取决于胚胎发育过程中的环境温度，称之为温度依赖型性别决定(temperature- dependent sex determination，TSD)．TSD的分子机制长期是个谜，特别是调控早期性腺分化的分子基础仍不清楚．本文通过表达分析和基因敲低手段研究了Sox9基因在红耳龟雄性性腺分化中的生物学功能，为TSD动物的性别决定和性腺发育的分子机制的研究奠定了基础．qRT-PCR显示，从性腺分化前的17期起，Sox9呈现产雄温度(male-producing temperature，MPT)性腺特异性高表达，而在产雌温度(female-producing temperature，FPT)性腺中表达水平极低．免疫组化进一步证实了SOX9蛋白的MPT特异性表达趋势，其定位于Sertoli前体细胞核中．温度置换实验显示，与MPT性腺相比，MPT→FPT性腺中(16期置换)的Sox9表达量从17期起就显著降低，表明Sox9能快速响应温度变化．同时MPT性腺经过雌激素处理后，Sox9表达量亦快速下调．功能缺失研究显示，经过Sox9-RNAi处理后，90.9%(20/22)的MPT性腺结构明显雌性化，皮质区高度发育，髓质区退化，揭示Sox9的敲低能导致雄性向雌性性逆转．上述研究表明，Sox9是红耳龟早期睾丸分化的关键调控因子，参与TSD的雄性分化通路