牛场肥水灌溉对土壤nirK、nirS型反硝化微生物群落结构的影响

以徐水县梁家营长期定位施肥试验田为研究对象，利用末端限制性片段长度多态性（T-RFLP）分析和克隆文库构建，研究了5种施肥处理（清水灌溉CK、无机肥灌溉CF、牛场肥水不同浓度、不同次数灌溉T4、T5和T11）下土壤中nirK、nirS型反硝化细菌群落多样性及其群落结构的演变。结果表明，不同施肥处理下nirK、nirS型反硝化细菌群落多样性无显著差异，但群落结构却有明显变化：nirK型反硝化细菌群落结构既受施肥种类又受施肥量影响，优势种群尤其对施肥种类和施肥量响应显著；nirS型反硝化细菌则主要受施肥种类影响，施肥量影响微弱。牛场肥水处理和无机肥处理分别促进和抑制不同的nirS型反硝化细菌，群落主成分受无机肥促进、牛场肥水抑制。系统发育分析结果表明，土壤中nirK型反硝化细菌主要与假单胞菌属（Pseudomonas）、产碱杆菌属（Alcaligenes）和根瘤菌属（Rhizobium）的反硝化细菌具有较近的亲缘关系；nirS型反硝化细菌主要与劳尔氏菌（Ralstonia）和红长命菌属（Rubrivivax）有较近的亲缘关系。试验土壤中反硝化微生物多与目前已报道的好氧反硝化细菌亲缘关系较近，这可能与微生物分析取自表层土有关