曲妥珠单抗对 SW-620 人结肠癌细胞增殖凋亡的影响及其与奥沙利铂协同作用的研究

目的 观察不同浓度曲妥珠单抗单独或联合奥沙利铂对 SW-620 人结肠癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响，并探讨其作用机制。 方法 体外培养 SW-620 人结肠癌细胞。① 细胞增殖实验：将细胞分为 2 个大组：曲妥珠单抗组和曲妥珠单抗+奥沙利铂组，每个大组内设 8 个浓度小组（每个小组设 5 个复孔），曲妥珠单抗组的浓度依次为 0、0.001、0.01、0.1、1、10、100 及 1 000 μg/mL，对应的曲妥珠单抗+奥沙利铂组曲妥珠单抗的浓度与前相同，不同之处在于均加入了奥沙利铂（10 μmol/L）。采用 CCK-8 法检测各组细胞的吸光度（A）值。② 细胞凋亡实验：组别设置同增殖实验，只是曲妥珠单抗的浓度仅包括 0、0.1、1 及 10 μg/mL。采用流式细胞仪检测各组细胞的细胞凋亡率及细胞周期分布。③ 人表皮生长因子受体 2（her-2）蛋白表达检测：分别以 0、100 及 1 000 μg/mL 曲妥珠单抗，以及 0、1 及 10 μg/mL 曲妥珠单抗联合奥沙利铂（10 μmol/L）处理 SW-620 细胞，采用 Western blot 法检测各组细胞中 her-2 蛋白的表达。 结果 ① 细胞增殖实验：同种浓度下曲妥珠单抗+奥沙利铂组的 A 值均低于曲妥珠单抗组（P<0.05），且随着曲妥珠单抗浓度的增加，A 值在逐渐降低。② 细胞凋亡实验：同种曲妥珠单抗浓度下，曲妥珠单抗组+奥沙利铂组的细胞凋亡率均较曲妥珠单抗组高（P<0.05）。流式细胞检测：不同浓度曲妥珠单抗+奥沙利铂处理后，随浓度增加，G1 期细胞比例呈下降趋势，S 期细胞比例呈上升趋势，且呈剂量依赖性；至 1 μg/mL 和 10 μg/mL 时，与曲妥珠单抗组比较，曲妥珠单抗+奥沙利铂组的 G1 期细胞比例较低，S 期细胞比例较高（P<0.05）；在 0.1、1 和 10 μg/mL 浓度的曲妥珠单抗条件下，曲妥珠单抗联合奥沙利铂组的 G2 期细胞比例较曲妥珠单抗组升高（P<0.01）。③ her-2 蛋白的表达水平：1、100 及 1 000 μg/mL 曲妥珠单抗组细胞中 her-2 蛋白的表达水平逐渐降低，3 组间两两比较差异均有统计学意义（P<0.05）；0、1 及 10 μg/mL 曲妥珠单抗+奥沙利铂组中 her-2 蛋白的表达水平也逐渐降低，3 组间两两比较差异也有统计学意义（P<0.05）。 结论 高浓度曲妥珠单抗可抑制 SW-620 人结肠癌细胞的增殖，诱导其凋亡。曲妥珠单抗和奥沙利铂具有协同抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的作用