IL-10 基因修饰的 BMSCs 对大鼠脑缺血再灌注损伤炎性因子及神经细胞凋亡的影响

目的 探讨 IL-10 基因修饰的 BMSCs 对大鼠脑缺血再灌注损伤（ischemia reperfusion injury，IRI）炎性因子及神经细胞凋亡的影响。 方法 取 SD 大鼠骨髓，采用贴壁培养法分离培养 BMSCs，经免疫组织化学染色鉴定后，取第 3 代 BMSCs 以重组腺病毒（recombinant adenovirus，Ad）介导 IL-10 基因转染（AdIL-10-BMSCs）。取 40 只清洁级成年 SD 雄性大鼠，采用线栓法制备大脑中动脉阻塞模型后随机分为 4 组，每组 10 只。模型制备后 3 h 于各组大鼠尾静脉注射 1 mL 含 10%FBS 的 L-DMEM 培养液（A 组）、61.78 ng IL-10（B 组）、1 mL BMSCs 悬液（细胞浓度为 2×106 个/mL，C 组）、1 mL AdIL-10-BMSCs 悬液（细胞浓度 2×106 个/mL，D 组）。C、D 组细胞移植前采用 BrdU 标记。7 d 后大鼠经颈总动脉灌注处死取脑组织，免疫染色法检测小胶质细胞（OX42）表达，ELISA 法测定 TNF-α、IL-1β含量，TUNEL 法检测神经细胞凋亡；取 C、D 组组织行 BrdU 免疫荧光染色观察。 结果 C、D 组脑组织中均见呈绿色荧光的 Brdu 阳性细胞，主要分布于梗死区周围的纹状体、大脑皮质、皮质下等。免疫组织化学染色示，B、C、D 组 OX42 阳性细胞数明显少于 A 组，D 组少于 B、C 组，比较差异有统计学意义（P<0.05）。ELISA 检测示 D 组大鼠脑组织中 TNF-α、IL-1β含量较其余 3 组明显降低（P<0.05）。TUNEL 法检测各组凋亡细胞（TUNEL 阳性细胞）主要见于梗死灶周围的纹状体及额顶皮质下脑组织（相当于缺血半暗带），D 组与 A、B、C 组比较差异有统计学意义（P<0.05）。 结论 AdIL-10-BMSCs 能通过抑制小胶质细胞分泌促炎性因子 TNF-α、IL-1β，抑制梗死灶周围脑组织神经细胞凋亡，对大鼠脑 IRI 起保护作用