5,6-二氢环戊烯1,2-二硫杂环戊烯-3-硫酮对高糖环境下大鼠视网膜Müller细胞的影响

目的 观察5,6-二氢环戊烯1,2-二硫杂环戊烯-3-硫酮（CPDT）对高糖环境下大鼠视网膜Müller细胞活性及其线粒体活性氧（ROS）生成量的影响，初步探讨CPDT对高糖环境下Müller细胞的保护作用及其机制。 方法 Sprague Dawley大鼠Müller细胞分为25 mmol/L对照组（A组）、65 mmol/L高糖（B糖）组、高糖+45 μmol/L CPDT组（C组）、高糖+60 μmol/L CPDT组（D组）、高糖+70 μmol/L CPDT组（E组）。培养72 h后，水溶性四唑盐（WST）-8法检测各组Müller细胞的细胞相对增生率；流式细胞仪测定各组Müller细胞ROS生成量及细胞凋亡率；蛋白免疫印迹法（Western blot）测定Müller细胞中核因子-E2相关因子2（Nrf2）、血红素合酶-1（HO-1）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）和Bcl相关X蛋白（Bax蛋白）表达的变化。 结果 WST-8法检测结果显示，与A组比较，B组Müller细胞活性明显下降，差异有统计学意义（ t=39.59， P＜0.05）。与B组比较，C组Müller细胞活性无明显提高，差异无统计学意义（ t=0.97， P＞0.05）；D、E组Müller细胞活性恢复，差异有统计学意义（ t=？4.67、？7.52， P＜0.05）。流式细胞仪检测结果显示，与A组比较，B组Müller细胞中ROS生成量增加，差异有统计学意义（ t=–30.99， P＜0.05）；与B组比较，D组Müller细胞中ROS含量明显下降，差异有统计学意义（ t=27.68， P＜0.05）。Western blot检测结果显示，与A组比较，B组Müller细胞Bax、Nrf2、HO-1蛋白表达显著上调，差异有统计学意义（ t=？11.03、？63.17、？11.44， P＜0.05） ；Bcl-2蛋白表达明显下调，差异有统计学意义（ t=7.861， P＜0.05）。与B组比较，D组Müller细胞Nrf2、HO-1、Bax蛋白表达均下调，差异有统计学意义（ t=15.11、26.59、6.27，均 P＜0.05）； Bcl-2蛋白表达上调，差异有统计学意义（ t=？6.53， P＜0.05）。 结论 CPDT降低高糖环境下Müller细胞中ROS含量，下调Nrf2、HO-1、Bax蛋白表达；其机制与激活Nrf2/HO-1氧化应激通路，改变Bcl-2蛋白之间的平衡性，影响线粒体氧自由基量生成，从而抑制细胞凋亡有关