黄芪多糖对脑死亡状态下肝脏的保护作用

目的 探讨脑死亡状态下黄芪多糖（Astragalus polysaccharide，APS）对肝脏损伤的保护作用及其机制。 方法 将 24 只健康成年雄性新西兰兔随机分为 3 组：空白对照组、脑死亡组和 APS 组，每组 8 只。3 组均于处理后 4 h 和 8 h 时处死 4 只新西兰兔获取血液和肝组织标本。空白对照组：于颅顶钻孔、颅内置 Foley 球囊导管，但不加压，维持麻醉。脑死亡组：建立渐进性颅内加压脑死亡模型。APS 组：诱导麻醉后立即经股静脉推注注射用 APS 12 mg/kg，建模处理同脑死亡组。采用全自动生化分析仪检测血液标本中的血清天冬氨酸氨基转移酶（aminotrans-ferase，AST）和丙氨酸氨基转移酶（alanine amino-transferase，ALT）水平，采用 ELISA 试剂盒检测肿瘤坏死因子 α（TNF-α）水平；采用 HE 染色观察肝脏组织的组织学变化；采用 SP 免疫组化染色方法检测肝脏组织中核转录因子 p65 蛋白（NF-κB p65）的表达。 结果 ① ALT 和 AST。不论是 4 h 还是 8 h 时，同时点与空白对照组比较，脑死亡组和 APS 组的 ALT 和 AST 水平均较高（P<0.05），且各时点脑死亡组的 ALT 和 AST 水平均高于 APS 组（P<0.05）。同组内比较，8 h 时空白对照组的 ALT 和 AST 水平与 4 h 比较差异均无统计学意义（P>0.05）；8 h 时脑死亡组的 ALT 和 AST 水平与 4 h 时比较均升高（P<0.05）；8 h 时 APS 组的 ALT 水平与 4 h 比较有所升高（P<0.05），但 AST 水平与 4 h 比较差异无统计学意义（P>0.05）。② TNF-α。不论是 4 h 还是 8 h 时，同时点与空白对照组比较，脑死亡组和 APS 组的 TNF-α 水平均较高（P<0.05），且各时点脑死亡组的 TNF-α 水平均高于 APS 组（P<0.05）。同组内比较，8 h 时空白对照组的 TNF-α 水平与 4 h 比较差异无统计学意义（P>0.05）；8 h 时脑死亡组和 APS 组的 TNF-α 水平比 4 h 均有所升高（P<0.05）。③ HE 染色结果。4 h 时空白对照组、脑死亡组和 APS 组的肝脏组织结构基本正常，无明显改变。8 h 时脑死亡组的肝细胞呈气球样改变，排列紊乱，胞质疏松淡染呈网状，汇管区见大量炎性细胞浸润，表现为较为明显的组织损伤。8 h 时 APS 组的肝细胞轻度水肿，排列正常，少量炎性细胞浸润，组织形态损伤较脑死亡组 8 h 时明显减轻。④ SP 免疫组化染色结果。4 h 时空白对照组、脑死亡组和 APS 组肝组织中 NF-κB p65 蛋白的表达水平比较差异无统计学意义（P>0.05）。8 h 时脑死亡组和 APS 组肝组织中 NF-κB p65 蛋白的表达水平均高于空白对照组 8 h 时（P<0.05），且脑死亡组肝组织中 NF-κB p65 蛋白的表达水平高于 APS 组（P<0.05）。同组内比较，8 h 时空白对照组肝组织中 NF-κB p65 蛋白的表达水平与 4 h 比较差异无统计学意义（P>0.05），但 8 h 时脑死亡组和 APS 组肝组织中 NF-κB p65 蛋白的表达水平均高于对应组 4 h 时（P<0.05）。 结论 脑死亡可导致肝脏损害，8 h 时的损害程度较 4 h 重；APS 对脑死亡后的肝脏损害具有保护作用，其可能机制为通过抑制 TNF-α 的生成以及抑制 NF-κB 信号通路的活化，从而减轻脑死亡后炎症反应对肝脏的损伤