糖尿病视网膜病变患者血浆miR-1470表达变化及可能机制探讨

目的观察探讨糖尿病视网膜病变（DR）患者血浆中miR-1470的表达变化及可能机制。 方法住院治疗的30例DR患者（DR组）以及在眼科门诊检查的30例糖尿病患者（DM组）、30名正常健康者（正常组）纳入研究。抽取三组受检者静脉血5 ml，提取血浆总RNA，纯化。通过基因芯片筛选出在DR患者血浆中具有差异表达的miRNA，并采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）验证基因芯片检测结果。采用生物信息学预测miRNA调控的潜在靶基因，筛选出miR-1470及其靶基因表皮生长因子受体（EGFR）。将人视网膜内皮细胞（hREC）分为正常组（糖浓度5.5 mmol/L）、高糖组（糖浓度25.0 mmol/L）。将hREC转染miR-1470模拟物建立miR-1470高表达细胞模型，并将其分为空白对照组、高表达组、阴性对照组。采用RT-PCR检测细胞中miR-1470表达；采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞中EGFR蛋白表达。两组间计量资料比较采用独立样本 t检验，多组间计量资料比较采用方差分析, 组间计量资料两两比较采用多重比较。 结果RT-PCR验证结果与基因芯片检测结果相符。DR组、DM组及正常组受检者血浆中miR-1470表达比较，差异有统计学意义（ F=63.486， P=0.049）。与DM组和正常组比较，DR组患者血浆中miR-1470表达明显减弱，差异有统计学意义（ q=111.2、73.9， P＜0.05）。高糖组hREC中miR-1470表达明显低于正常组，差异有统计学意义（ t=42.082， P=0.015）。高糖组hREC中EGFR蛋白表达明显高于正常组，差异有统计学意义（ t=？39.939， P=0.016）。空白对照组、阴性对照组、高表达组hREC中miR-1470表达（ F=637.069， P=0.000）、EGFR蛋白表达比较，差异有统计学意义（ F=122.908， P=0.000）。与空白对照组、阴性对照组比较，高表达组hREC中miR-1470表达明显升高（ q=329.7、328.8， P＜0.05），EGFR蛋白表达明显降低（ q=242.5、234.6， P＜0.05），差异均有统计学意义。阴性对照组与空白对照组hREC中miR-1470表达、EGFR蛋白表达比较，差异无统计学意义（ q=1.5、7.9， P＞0.05）。 结论DR患者血浆中miR-1470表达明显下调，EGFR表达增加可能与其有关