BMSCs旁分泌对软骨细胞IL-1β损伤后的保护作用

目的研究BMSCs对于软骨细胞IL-1β损伤后的保护作用，以及BMSCs存在情况下软骨细胞对于IL-1β抵抗能力的变化。 方法取SD大鼠6只随机分为实验组（制备膝关节软骨缺损）和对照组，6 h后取软骨组织行实时定量PCR（quantitative real-time PCR，qRT-PCR）和ELISA检测IL-1β基因表达和相对含量。BMSCs修复功能实验：取培养的18孔SD大鼠软骨细胞随机分为3组（n=6），空白组不作处理，损伤组和共同培养组细胞采用IL-1β干预后，共同培养组使用Transwell小室建立SD大鼠BMSCs与软骨细胞共同培养体系，采用qRT-PCR法测定软骨细胞含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Caspase-3）和含凝血酶敏感素基序的去整合素金属蛋白4（a disintegrin and metalloprotease with Thrombospondin motifs 4，ADAMTS-4）、ADAMTS-5 mRNA相对表达量，ELISA法检测各组Caspase-3含量，以及流式细胞术检测各组细胞凋亡率。BMSCs保护功能实验：将12孔软骨细胞分为2组（n=6），共同培养组置入含BMSCs的Transwell小室后，两组均采用IL-1β干预，检测指标同修复功能实验。 结果动物体内损伤现象研究结果示，实验组IL-1β mRNA相对表达量和IL-1β相对含量均高于对照组（P＜0.05）。BMSCs修复功能实验结果示，损伤组和共同培养组Caspase-3、ADAMTS-4、ADAMTS-5 mRNA相对表达量及Caspase-3含量、细胞凋亡率均显著高于空白组，损伤组显著高于共同培养组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。BMSCs保护功能实验结果示，共同培养组Caspase-3、ADAMTS-4、ADAMTS-5 mRNA相对表达量及Caspase-3含量、细胞凋亡率均显著低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论作为组织工程种子细胞的BMSCs同时具有抗炎、抗凋亡的应用潜质