缺氧状态下人视网膜色素上皮细胞中音猥因子与血管内皮生长因子表达的关系

目的 观察缺氧状态下人视网膜色素上皮（hRPE）细胞中音猥因子（Shh）与血管内皮生长因子（VEGF）表达的关系。 方法 传代培养hRPE细胞，取对数生长期3～6代细胞用于实验。将hRPE细胞分为正常对照组、缺氧实验组及环巴明抑制组。缺氧实验组加入100 μmol/L CoCl 2，环巴明抑制组于制作缺氧状态前1 h加入20 μmol/L的环巴明进行预处理。3组细胞培养4、8、12、24 h。采用荧光定量聚合酶链反应检测3组hRPE细胞中Shh、VEGF mRNA表达。采用酶联免疫吸附法检测正常对照组、缺氧实验组细胞培养上清液中Shh、VEGF蛋白表达。采用Pearson相关性分析法分析缺氧实验组hRPE细胞中Shh、VEGF mRNA表达与蛋白表达之间的关系。 结果 正常对照组可见少量Shh、VEGF mRNA及蛋白表达。缺氧实验组Shh、VEGF mRNA及蛋白表达较正常对照组明显增加，差异有统计学意义（ F=178.364、183.732、77.456、91.572， P＜0.01）。环巴明抑制组Shh、VEGF mRNA表达较缺氧实验组明显降低，差异有统计学意义（ F=68.745、121.834， P＜0.01）。相关性分析结果显示，缺氧实验组hRPE细胞中Shh蛋白表达与VEGF蛋白表达呈正相关（ r=0.942， P＜0.05）；Shh mRNA表达与VEGF mRNA表达呈正相关（ r=0.970， P＜0.01）。环巴明抑制组hRPE细胞中Shh mRNA表达与VEGF mRNA表达无相关性（ r=0.915， P＞0.05）。 结论 缺氧状态下hRPE细胞中Shh与VEGF表达呈正相关