Beclin-1 分子在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨 Beclin-l 基因与胰腺癌发生发展的关系。 方法 ① 回顾性收集 2009 年 4 月至 2009 年 11 月期间四川大学华西医院行手术切除的胰腺癌标本 25 例及正常胰腺组织 20 例，采用实时荧光定量 PCR 和免疫组化染色方法分别检测胰腺癌组织及正常胰腺组织中 Beclin-1 mRNA 及其蛋白的表达水平，并分析胰腺癌组织中 Beclin-1 蛋白的表达水平与患者临床病理学特征之间的关系。② 将 PANC-1 细胞分为 2 组，转染组细胞转染 PLenO-WPI-Beclin-1 重组慢病毒载体，未转染组细胞未进行重组慢病毒载体转染，分别于共培养 24 及 48 h 时采用 PCR 法检测 Beclin-1 mRNA 的表达水平。③ 将 PANC-1 细胞分为 3 组，转染组加入 PLenO-WPI-Beclin-1 重组慢病毒载体，空载体组加入 PLenO-WPI 载体，空白对照组未加入任何载体，各组细胞于培养 1～7 d 期间每天采用 MTT 法检测细胞增殖情况。 结果 ① 人胰腺癌中 Beclin-1 mRNA 及其蛋白的表达水平均低于正常胰腺组织（P<0.05）。在胰腺癌患者中，Beclin-1 蛋白的表达水平与患者的年龄、性别、肿瘤直径及分化程度均无关（P>0.05），而与 TNM 分期及淋巴结转移有关，TNM Ⅲ期和Ⅳ期患者的 Beclin-1 蛋白的表达水平低于Ⅰ期或Ⅱ期患者（P<0.05）；淋巴结转移阳性患者的 Beclin-1 蛋白的表达水平低于阴性患者（P=0.011）。② 转染 24 h 和 48 h 时，同时点转染组细胞中 Beclin-1 mRNA 的表达水平高于未转染组（P<0.05）。③ MTT 实验结果显示，转染 1、2 及 3 d 时，转染组、空载体组和空白对照组细胞的 OD 值比较差异均无统计学意义（P>0.05）；从转染 4 d 开始，至转染 7 d 期间，同时点转染组细胞的 OD 值较空白对照组和空载体组均较低（P<0.05）。 结论 Beclin-1 基因及其蛋白在胰腺癌组织中的表达均下调，其可能是胰腺癌发生发展的原因之一。将 Beclin-1 基因导入 PANC-1 细胞后，细胞的增殖能力降低，提示 Beclin-1 基因可能是胰腺癌基因治疗的目标基因