家兔脑死亡供肝细胞凋亡水平的定量研究

目的通过建立稳定的家兔脑死亡模型，应用TUNEL、免疫印迹和免疫组织化学方法检测脑死亡状态下肝脏细胞凋亡水平，从而研究家兔脑死亡供肝细胞凋亡情况。 方法30只新西兰家兔采用缓慢间断颅内加压的方法建立稳定的脑死亡模型，根据脑死亡时间不同分为2、6及8 h组，每组10只家兔，同时设立对应时间点的假手术组（30只）。分别进行相应处理后收集肝脏组织标本，用TUNEL法检测肝细胞凋亡率，用免疫印迹法检测细胞凋亡蛋白Cleaved-caspase 3的表达，用免疫组织化学方法检测Cleaved-caspase 3的表达。 结果TUNEL检测结果显示，脑死亡组各时间点肝细胞凋亡率均高于对应时间点的假手术组（P＜0.05），且随着脑死亡时间的延长肝细胞凋亡率逐渐升高（P＜0.05）。免疫印迹检测结果及免疫组织化学法检测结果均显示，Cleaved-caspase 3蛋白的相对表达量随着脑死亡时间的延长逐渐增高（P＜0.05），且脑死亡组各时间点Cleaved-caspase 3蛋白的相对表达量均高于对应时间点的假手术组（P＜0.05）。 结论脑死亡供肝与细胞凋亡的关系密切；随着家兔脑死亡时间的延长，肝细胞凋亡水平逐渐增加，从而影响脑死亡供肝的质量