人垂体瘤转化基因 1 抑制卵巢癌 A2780 细胞凋亡的分子机制研究

目的 利用小干扰 RNA（small interfering RNA，siRNA）片段沉默卵巢癌细胞人垂体瘤转化基因 1（human pituitary tumor-transforming gene 1， hPTTG1）基因表达，探讨其抑制细胞凋亡的分子机制。 方法 通过脂质体将 hPTTG1 siRNA 转染 A2780 细胞（ hPTTG1 siRNA 干扰组），并设立正常组和阴性对照组，转染 48 h 后进行检测。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测转染前后 hPTTG1 mRNA 表达水平的变化，采用逆转录-聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测 survivin mRNA 和蛋白表达水平，采用 DNA 梯带电泳法和碘化丙啶单染法分析细胞凋亡，采用比色法测定胱天蛋白酶（caspase）-3 活性。 结果 hPTTG1 siRNA 可抑制 A2780 细胞内 hPTTG1 mRNA 表达； hPTTG1 siRNA 干扰组可见典型的细胞凋亡阶梯状电泳，流式细胞仪检测该组细胞凋亡率为（17.53±2.17）%，明显高于正常组和阴性对照组[（8.97±1.56）%、（9.64±1.31）%]，差异有统计学意义（ P<0.05）； hPTTG1 干扰后 survivin mRNA 和蛋白表达均下调，caspase-3 活性增强。 结论 hPTTG1 siRNA 可下调 survivin 基因表达，活化 caspase-3，导致 A2780 细胞凋亡，其可成为卵巢癌基因治疗的潜在靶点