人BMSCs分化过程中免疫能力的实验研究

目的研究人BMSCs在成骨、成软骨及成脂分化过程中的免疫原性及其对外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC）增殖的抑制能力。 方法取健康志愿者骨髓分离培养BMSCs，分别进行成骨、成软骨和成脂诱导分化7、14、21 d。通过流式细胞术检测未分化及分化过程中BMSCs的人类白细胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）Ⅰ类及Ⅱ类分子表达水平的改变。分离培养健康志愿者PBMC，按10∶1比例将PBMC与BMSCs共培养5 d，通过流式细胞术检测未分化及分化过程中BMSCs对PBMC增殖的抑制能力变化。 结果未分化BMSCs表达HLA-Ⅰ类分子，基本不表达HLA-Ⅱ类分子。成骨、成软骨分化过程中各时间点HLA-Ⅰ、Ⅱ类分子表达无明显改变（P＞0.05），且HLA-Ⅱ类分子表达水平均较低。成脂分化14、21 d HLA-Ⅰ类分子表达逐渐升高，与0、7 d比较差异有统计学意义（P＜0.05）；成脂分化7、14、21 d HLA-Ⅱ类分子表达也逐渐出现并升高，均显著高于0 d（P＜0.05）。PBMC在无抗CD3、CD28微球刺激下无明显增殖，加入抗CD3、CD28微球后显著增殖，未分化BMSCs能显著抑制PBMC的增殖。成骨、成软骨分化过程中BMSCs抑制PBMC增殖能力无明显改变（P＞0.05）。成脂分化7、14、21 d，BMSCs抑制PBMC增殖能力逐渐减弱，各时间点间差异均有统计学意义（P＜0.05）。 结论人BMSCs成骨、成软骨分化过程中仍具有低免疫原性和较强的免疫抑制能力，可作为同种异体组织工程修复和生物治疗的细胞；而成脂分化后免疫原性升高、免疫抑制能力降低，不适合作为同种异体组织工程修复和生物治疗的细胞