人尿液干细胞联合硫酸软骨素酶 ABC 对脊髓损伤后神经生长因子和脑源性神经营养因子表达的影响

目的 探讨大鼠脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）后，行人尿液干细胞（human urine-derived stem cells，hUSCs）移植以及联合硫酸软骨素酶 ABC（chondroitinase ABC，chABC）鞘内注射，对脊髓组织神经生长因子（nerve growth factor，NGF）及脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）的影响，以及其相关分子机制。 方法 取人尿液分离培养 hUSCs 并鉴定。利用 Allen 法建立大鼠 SCI 模型；将 60 只大鼠随机分为 5 组（n=12），分别为假手术组（A 组）、SCI 组（B 组）、SCI+hUSCs 组（C 组）、SCI+chABC 组（D 组）、SCI+hUSCs+chABC 组（E 组）。模型制备后 10、20、30 d，利用 BBB 评分法评价大鼠下肢运动功能；30 d 时取脊髓组织，采用实时荧光定量 PCR 检测及免疫组织化学染色观察 NGF、BDNF 表达情况，Western blot 检测 Bax、Bcl-2 蛋白表达。 结果 经鉴定，培养的细胞具有多向分化特性，为 hUSCs。SCI 模型制备后 10、20、30 d，B 组下肢运动功能 BBB 评分均显著低于 A、C、D、E 组，C、D、E 组显著低于 A 组，C、D 组低于 E 组，比较差异均有统计学意义（P<0.05）。实时荧光定量 PCR 及免疫组织化学染色检测示，模型制备后 30 d，B 组 NGF、BDNF 表达显著低于 A、C、D、E 组，C、D、E 组显著低于 A 组，C、D 组低于 E 组，比较差异均有统计学意义（P<0.05）；C、D 组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。Western blot 检测显示，B 组 Bax 蛋白相对表达量明显高于 A、C、D、E 组，C、D、E 组显著高于 A 组，C、D 组高于 E 组，比较差异均有统计学意义（P<0.05）； B 组 Bcl-2 蛋白相对表达量显著低于 A、C、D、E 组，C、D、E 组显著低于 A 组，C、D 组低于 E 组，比较差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论 hUSCs 对大鼠 SCI 具有修复作用，通过联合 chABC 可促进 SCI 修复，其机制可能是通过促进 NGF 和 BDNF 表达，抑制神经细胞凋亡，发挥保护作用